犬细小病毒昆明流行株的分离鉴定与VP2基因序列分析

摘要：

为了解昆明市犬细小病毒 (canine parvovirus, CPV) 流行及抗原变异情况, 有针对性地筛选疫苗及研发新疫苗, 本研究从昆明市部分宠物医院收集6份疑似CPV粪便样品进行病毒分离培养, 对获得的疑似病毒液进行PCR、免疫荧光试验 (IFA) 、血凝效价测定、TCID50测定及VP2基因序列分析.结果显示, 分离的1株病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变 (CPE), PCR扩增产物大小为164bp, IFA鉴定感染的F81细胞出现绿色荧光, 血凝效价为1∶512, 病毒TCID50为10-4.375/0.1mL, VP2基因PCR扩增条带大小为1 755bp.对分离株VP2结构蛋白进行测序分析, 判定该分离株为CPV-2a亚型, 与标准毒株存在5个变异氨基酸位点, 属于变异株.将测序结果与商品化疫苗株及国内参考株序列进行比对分析, 结果显示与弱毒苗Intervet/vaccine/06和Pfizer/vaccine/06核苷酸同源性均为98.7％;与国内参考毒株序列同源性为98.2％～99.5％, 与ANTU-1和WH02/06株同源性最高;与ANTU-1株、WH02/06株及BJ01株亲缘关系最近, 位于进化树的同一簇.本研究对监测CPV的遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义.

关键词：犬细小病毒 (CPV)、分离、鉴定、VP2基因

所属期刊栏目：46

分类号：S852.65+5(动物医学（兽医学）)

资助基金：校企合作项目:犬干细胞系列产品的研发与应用2017530117000288

在线出版日期：2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：206-214