拉沙里菌素单克隆抗体的研制及间接竞争ELISA检测方法的建立

摘要：

为制备拉沙里菌素(LAS)单克隆抗体,建立针对LAS的间接竞争ELISA (Ci-ELISA)方法,试验采用了活性酯法将LAS分别与BSA和OVA偶联成LAS-BSA和LAS-OVA作为免疫原和检测原,6次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,最终筛选出一株能稳定分泌抗LAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株C11.经鉴定,C11的抗体类型为IgG1,轻链为κ链;所制腹水效价为1∶16 000,与莫能菌素钠、盐霉素钠、马杜霉素胺、头孢噻吩钠和硫酸链霉素均无交叉反应.用此单克隆抗体建立LAS Ci-ELISA检测方法显示,Ci-ELISA标准工作曲线为y=0.376x-0.2374(R2=0.9914),LAS在5～1 000 ng/mL时,线性关系良好,IC50为90.22 ng/mL,加标回收率为81.76％～102.41％,表明方法精确度好、灵敏度高.LAS单克隆抗体的制备和Ci-ELISA方法的建立为下一步试剂盒的研发奠定了基础.

关键词：拉沙里菌素、半抗原、单克隆抗体、间接竞争ELISA

所属期刊栏目：45

分类号：S859.84(动物医学（兽医学）)

资助基金：牛羊碳水化合物、蛋白质与能量代谢失衡防控技术研究2016YFD0501206

在线出版日期：2017-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3049-3056