基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白在昆虫细胞中的表达及免疫效力研究

摘要：

本试验旨在利用杆状病毒表达系统对基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)F基因进行表达研究.RT-PCR扩增F基因,将其克隆到pFastBac HT A载体中,阳性重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,PCR鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得含F基因的重组杆状病毒质粒,重组病毒感染Sf9细胞72 h后,进行SDS-PAGE电泳、间接免疫荧光和Western blotting检测.免疫SPF鸡,间接ELISA测定抗体滴度,攻毒保护试验检测重组F蛋白保护性.结果显示,F蛋白在昆虫细胞中能够特异性表达,该蛋白诱导了高滴度的NDV特异性抗体,具有良好的免疫原性;重组F蛋白免疫组攻击保护率达到90%,明显高于阴性对照组.本研究结果为NDV新型亚单位疫苗的研究奠定了基础.

关键词：新城疫病毒、融合蛋白F、重组杆状病毒、昆虫细胞、免疫效力

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分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：徐州生物工程职业技术学院畜牧兽医品牌专业建设项目;2015年徐州市科技计划项目KC15N0016

在线出版日期：2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1840-1846