猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

摘要：

为建立一种快速、灵敏、简便的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)早期检测方法,本研究利用逆转录环介导恒温扩增技术(RT-LAMP),针对PRRSV的ORF5基因片段设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在65 ℃恒温条件下进行逆转录扩增,通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和加入SYBR Green Ⅰ染料肉眼判断结果,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法.结果表明,该检测方法具有良好的特异性,与其他常见病毒如猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒等无交叉反应,较普通RT-PCR灵敏性高100倍.采用RT-LAMP和RT-PCR分别对10份临床样本同时进行检测,符合率为100%.因此,本研究建立的RT-LAMP是一种可适用于临床PRRSV检测的快速、简单、灵敏、特异的检测方法.

关键词：逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、快速检测

所属期刊栏目：44

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技厅项目2013JY0127;四川省重点实验室项目ESP1505;四川省教育厅项目16ZA0321

在线出版日期：2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1630-1636