猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

摘要：

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)引起的猪的一种急性、高度传染性肠道疾病,给养猪业造成了严重的经济损失.本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为20 tμg/mL,血清标准品最佳稀释度为1∶500,包被时间为4℃过夜,5％小牛血清37℃封闭1h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用1h,抗体临界值为D450nm≥0.289判为阳性,D450nm≤0.236判为阴性,介于二者之间为可疑.检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、细小病毒和口蹄疫病毒标准血清抗体均为阴性,重复试验变异系数均小于10％,对江苏、江西、福建、广东地区74份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达84％,表明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查.

关键词：猪流行性腹泻病毒、ELISA、包被、抗体

所属期刊栏目：44

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：大学生创新创业训练计划项目201510564099

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：377-383