ELISpot技术检测猪抗口蹄疫γ干扰素方法的建立

摘要：

猪口蹄疫免疫防御是控制猪口蹄疫疫情的重要手段，免疫水平指标通常用免疫抗体水平判定。对于其细胞免疫水平检测尚缺乏成熟可靠的技术，本试验利用市售 ELISpot 试剂盒建立猪口蹄疫特异γ干扰素检测方法，刺激物分别采用疫苗全病毒颗粒（O／Mya98／XJ／2010）、口蹄疫病毒 T 细胞表位多肽池，以植物血凝素（PHA）为阳性对照，对细胞浓度、刺激物浓度、孵育时间等进行优化。优化条件为：外周血 PBMC 新鲜提取或冻存细胞成活率90％以上，最佳细胞数为2×105个／孔，最佳反应时间是16 h，病毒粒子146 S 含量为100 ng／mL，多肽最佳浓度10μg／mL，PHA 的最佳浓度是20μg／mL。ELISpot 技术检测口蹄疫病毒感染猪γ干扰素方法的建立，为口蹄疫免疫力评价及口蹄疫疫苗免疫效果评估及进一步研究其与疫苗保护力（PD50）的相关性奠定基础。

关键词：ELISpot、口蹄疫、γ干扰素

所属期刊栏目：44

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金81172777；大连市科技计划基金2014B11NC096

在线出版日期：2017-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：53-58