特异性靶向犬细小病毒融合DNA疫苗的构建及免疫效果的研究

摘要：

研究旨在构建特异性靶向犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)融合 DNA 疫苗,探讨其诱导机体产生免疫应答的效果。试验用重组技术构建了含细胞毒性 T 淋巴细胞抗原-4胞外区(CTLA-4125)与犬细小病毒 VP2的主要抗原表位区域(VP2228)融合表达质粒 pVAX1-CTLA-4125-VP2228,同时构建了不含 CTLA-4125的 pVAX1-VP2228,体外转染 COS-7细胞,Western blotting 检测其表达产物；将 pVAX1-CTLA-4125-VP2228、pVAX1-VP2228分别免疫小鼠,免疫后进行抗体水平测定和抗体亚型分析；通过淋巴细胞增殖试验和 ELISA 分别检测淋巴细胞刺激指数和γ-干扰素表达水平。结果显示成功构建了 pVAX1-CTLA-4125-VP2228和 pVAX1-VP2228,并能在 COS-7细胞中正确表达；抗体检测结果显示 pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组抗体水平显著高于 pVAX1-VP2228免疫组(P ＜0.05)；淋巴细胞增殖试验显示 pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组的刺激指数显著高于 pVAX1-VP2228免疫组(P ＜0.05)；γ-干扰素表达水平测定显示 pVAX1-CTLA-4125-VP2228免疫组极显著高于 pVAX1-VP2228免疫组(P ＜0.01)。结果表明,CTLA-4125-VP2228融合 DNA 能有效增强动物对 VP2228抗原的免疫应答,为进一步研究融合 DNA 疫苗特异性的靶向递呈机制奠定基础。

关键词：犬细小病毒、DNA 疫苗、抗原递呈细胞、靶向性

所属期刊栏目：43

分类号：R392

资助基金：江苏农牧科技职业学院院级课题NSFYB1302；公益性行业农业科研专项经费项目201303042；中国农业科学院科技创新工程ASTIP-IAS-11

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2768-2774