H3N2亚型猪流感病毒HA1、HA2基因的原核表达及抗原性分析

摘要：

血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白是猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的一个重要蛋白,在疾病预防和治疗中具有重要作用。本试验旨在克隆和表达 H3N2亚型猪流感病毒 A/swine/Henan/1/2010(H3N2)的 HA1和 HA2基因。用含有 H3N2亚型 SIV 的鸡胚尿囊液提取 RNA,RT-PCR 扩增后将目的基因定向克隆到 pET-28a (+)原核表达载体上,并将其转入宿主菌 BL21(DE3)pLyS 进行表达,IPTG 诱导后经 SDS-PAGE 检测并用该病毒重组 HA 蛋白制备的特异性单克隆抗体1C10作为一抗对两种蛋白进行 Western blotting 分析。SDS-PAGE 结果显示,得到 HA1和 HA2大小分别为34.8、23.2 ku 的重组蛋白,Western blotting 结果表明,HA1蛋白与1C10单克隆抗体具有良好的反应原性,且1C10单克隆抗体表位在 HA1蛋白上。本试验结果为进一步研究血凝素蛋白的结构和功能,以及建立快速诊断方法和基因工程疫苗提供材料。

关键词：H3N2亚型猪流感病毒、HA1基因、HA2基因、原核表达

所属期刊栏目：43

分类号：S852.65+9.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省科技创新人才计划144100510009；郑州市前沿技术研究开发项目141PQYJS566；河南省产学研合作项目15210700096

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2762-2767