不同类型CpG基序对细粒棘球蚴Eg95抗原的免疫增强作用研究

摘要：

为探究不同类型 CpG 基序对细粒棘球蚴(Echinococus granulosus )Eg95抗原的免疫增强作用,将 pET-32a-3Eg95重组大肠杆菌,经 IPTG 诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白 pET-32a-3Eg95。将重组蛋白分别与常规佐剂 Quli-A、pUC18-CpG 和 CpG ODN 混合制备基因工程亚单位疫苗样品,免疫小鼠。通过间接 ELISA 方法检测抗体水平,通过实时荧光定量 PCR 方法测定体外刺激试验后细胞因子的相对表达量,检测不同佐剂在体液免疫和细胞免疫方面对 Eg95抗原免疫效果的增强作用。结果显示,诱导表达重组蛋白的大小约为56 ku,与理论值相符,用羊细粒棘球蚴阳性血清检测有特异性条带；pUC18-CpG 组和 CpG ODN 组小鼠免疫后14、28、42 d 的抗体平均水平(D 450 nm )分别为3.10、3.03、3.22和2.98、3.12、3.27,与 Quli-A 组抗体平均水平相比均差异显著(P ＜0.05)；CpG ODN 组血清中抗体平均水平略高于 pUC18-CpG 组,但差异不显著(P >0.05)。重组蛋白刺激后 pUC18-CpG 组与CpG ODN 组 IFN-β、IFN-γ和 TNF-α的相对表达量分别为6.88、2.35、6.28和5.03、2.85、7.07,与 Quli-A 组相比差异均显著(P ＜0.05)。因此相对于常规佐剂 Quli-A,pUC18-CpG 和 CpG ODN 在体液免疫和细胞免疫方面对Eg95抗原都有显著的免疫增强作用,CpG ODN 的免疫增强作用略优于 pUC18-CpG,二者均可作为免疫佐剂,增强现有包虫病基因工程疫苗抗原的免疫效果。

关键词：细粒棘球蚴、pUC18-CpG、CpG ODN、免疫刺激活性

所属期刊栏目：43

分类号：S855.9(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31402232

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2716-2723