10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.10.018
4种抗原定量方法观察牛支原体培养特征
为探索在疫苗研制过程中牛支原体抗原收获时间及抗原定量替代方法,将牛支原体08M 株接种于含10%马血清的 Thiaucourt’s 培养基,在110 h 内同时监测其颜色变化单位(color change units,CCU)、菌落形成单位(colony forming units,CFU)、菌体蛋白浓度和核酸含量的变化,绘制相应曲线。活菌计数结果(CCU 和 CFU)显示,牛支原体生长可分为明显的4期,10 h 进入对数期,30 h 进入稳定期,活菌数最高可达1.0×108 CCU/mL 和7.7×107 CFU/mL,75 h 进入衰亡期;蛋白浓度从15 h 开始迅速增长,至35 h 蛋白浓度最高,为72.06μg/mL,此后维持在58.38~70.65μg/mL;核酸含量从15 h 开始增长,至25 h 后 Ct 值维持在15.32~17.84。结果表明,牛支原体蛋白含量在稳定期初期与活菌数具有良好的相关性。因此,在牛支原体灭活疫苗生产中,稳定期初期是最佳抗原收获时间,可用蛋白浓度法代替活菌计数法进行抗原定量。
牛支原体、抗原定量、颜色变化单位、菌落形成单位、蛋白浓度、核酸含量
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S852.62(动物医学(兽医学))
国家科技支撑计划2015BAD12B02;甘肃省科技支撑计划1204NKCA071;兰州市城关区科技计划2012-2-1
2016-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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