应用巢式PCR法检测猪单个胚胎中的基因突变

摘要：

单胚胎基因突变检测技术是以单个胚胎的裂解产物为模板进行 DNA 或 RNA 分析的方法，该技术的建立将为在单细胞水平进行基因表达和突变检测提供简便而快捷的方法。本研究设计了2对巢式引物，以显微注射了Cas9 mRNA 和猪 SS 基因2个靶点的 gRNA 的四细胞期孤雌胚胎为试验材料，通过蛋白酶 K 对猪单个胚胎进行裂解后直接进行巢式 PCR 分型，并检测到猪胚胎中 SS 基因的删除突变。该方法可以最大限度减少假阴性和假阳性结果的出现，在猪基因突变检测中具有重要作用。

关键词：巢式PCR、单细胞裂解、CRISPR/Cas9技术、基因突变

所属期刊栏目：43

分类号：S814.6(普通畜牧学)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2016ZX08006001-005、2016ZX08006002-006、2016ZX08010003-006；湖北省农业科技创新中心2016-620-000-001-027；湖北省科技支撑计划2014BBB010；湖北省农科院青年基金2014NKYJJ02、2016NKYJJ19

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2566-2571