犬α-干扰素蛋白在不同表达载体中的生物学活性比较

摘要：

根据 GenBank 中公布的犬α-干扰素(CaIFN-α)基因核酸序列，去掉信号肽后设计并合成1对引物，引入EcoRⅠ和 HindⅢ酶切位点。以提取的犬肝脏 DNA 为模板，利用 PCR 技术扩增 CaIFN-α基因，并分别克隆至表达载体 pBV220、pET-32a(His 标签)中，转化大肠杆菌 BL21(DE3)原核表达系统。重组融合蛋白经 SDS-PAGE 及Western blotting 鉴定。纯化目的蛋白，并采用 MDCK/VSV 微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。试验结果表明，与 pBV220载体连接的目的基因表达的蛋白活性较低，而与 pET-32a(His 标签)连接的目的基因表达的蛋白活性较高，达2.56×106 U/mL。通过分析不同载体对 IFN-α的表达情况，为生产高活性的 IFN 奠定基础。

关键词：犬、α-干扰素、原核表达、生物学活性

所属期刊栏目：43

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：公益性行业农业项目“宠物疫病快速诊断与疫苗研究与示范”201303042

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2560-2565