猪传染性胃肠炎病毒截短S基因原核表达及免疫原性初步检测

摘要：

为监测猪场猪群中猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)抗体水平,本研究利用 TGEV 冻存液,通过 RT-PCR 扩增得到 S 基因的主要抗原片段 B/C 区约560 bp,将其酶切后连接到 pET-32a 载体,转化大肠杆菌 BL21感受态细胞。挑取转化成功的部分菌落进行 PCR 试验,将目的条带正确的菌落添加到 LB 培养基过夜培养,提取重组质粒并送测序。培养测序正确的菌液,利用 IPTG 诱导蛋白表达,通过 SDS-PAGE 试验,在约37 ku 位置有一明显的目的条带。利用自制猪传染性胃肠炎兔血清通过 Western blotting 试验检测纯化的重组蛋白,在37 ku 处可见一条带,表明此重组蛋白具有一定的免疫原性。本研究将有助于研究 TGEV ELSIA 检测试剂盒的组装并进行 TGEV抗体水平的监测,为猪场免疫情况提供相应参考。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、B/C区、截短表达

所属期刊栏目：43

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省省级科技计划项目2015B020230009

在线出版日期：2016-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2541-2546