转双基因（pGH／IGF-Ⅰ）猪胎儿成纤维细胞系的建立及鉴定

摘要：

本研究旨在建立转双基因（pG H／IG F‐Ⅰ）猪胎儿成纤维细胞系，保存转双基因猪的成纤维细胞以便于后续细胞水平研究。试验采用胰蛋白酶消化法对猪胎儿躯干组织进行原代培养，通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功分离出转双基因猪胎儿成纤维细胞，并对细胞进行了形态学观察、冻存前和复苏后细胞活力检测、生长动力学分析、波形蛋白免疫组化及微生物污染检测等生物学特性分析。结果显示，原代细胞经过胰蛋白酶消化和差速离心分离培养出成纤维细胞，冻存前细胞活力为94.3％，冻存3个月后细胞复苏后活力为91.2％；细胞生长总趋势呈“S”型，经历了潜伏期、指数生长期和平台期3个阶段；细胞波形蛋白在成纤维细胞中呈阳性反应；细胞的细菌、真菌、病毒和支原体检测均为阴性。结果表明本试验成功建立了转双基因猪成纤维细胞系。

关键词：转双基因猪、成纤维细胞系、细胞培养、生物学特性

所属期刊栏目：43

分类号：Q343.6(遗传学分支学科)

资助基金：国家转基因生物新品种培育科技重大专项2014ZX08006-003；山东省现代农业产业技术体系生猪创新团队建设项目SDAIT-06-022-02

在线出版日期：2016-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2053-2059