猪伪狂犬病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立

摘要：

本研究根据猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的gE基因序列特点,设计特异性实时荧光定量引物,建立基于SYBR GreenⅠ染料的猪PRV实时荧光定量PCR方法。结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法检测猪PRV gE基因在7.53×101~7.53×106拷贝/μL范围内有较好的线性关系；对猪圆环病毒(porcine circovirus 2,PCV2)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)和猪链球菌(Streptococcus susi)核酸均未见阳性扩增信号；从生成的熔解曲线可见,建立的方法仅对猪 PRV 检测出现单一特异峰,其熔解温度(Tm值)为(92.9±0.1)℃,PCV2、PPV、副猪嗜血杆菌和猪链球菌均未见特异性峰值；建立的实时荧光定量 PCR方法的组内和组间变异系数分别为0.31%~1.14%和0.42%~1.74%。以上结果表明,本研究建立的猪 PRV实时荧光定量PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,为深入开展猪PRV对宿主致病机制的研究提供检测手段。

关键词：猪伪狂犬病毒、gE基因、SYBR GreenⅠ、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：43

分类号：S852.65+5(动物医学（兽医学）)

资助基金：福建省属公益类科研专项2014R1023-13、2015R1023-10

在线出版日期：2016-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1717-1722