猪乙型脑炎病毒E蛋白结构域Ⅲ原核表达和抗原性分析

摘要：

为分析猪乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白Ⅲ结构域的抗原性,本研究克隆了JEV疫苗株SA14-14-2的E蛋白结构域Ⅲ,并通过pET-28a载体进行融合表达和纯化.用纯化后蛋白作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,通过SDS-PAGE、Western blotting、间接ELISA及间接免疫荧光方法(IFA)检测小鼠及猪抗体滴度,验证E蛋白结构域Ⅲ的抗原性.SDS-PAGE结果表明融合蛋白以包涵体形式表达;Western blotting、间接ELISA检测结果表明表达产物具有良好的抗原性;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠ELISA方法检测特异性抗体滴度可达1×105;猪JEV阳性血清ELISA抗体滴度可达5.1×104;IFA结果表明JEV EⅢ蛋白产生的抗血清能很好的识别乙型脑炎病毒抗原.以上结果表明,表达、纯化的重组JEV EⅢ蛋白具有良好的抗原性.本试验结果为建立以E蛋白结构域为抗原的诊断方法提供了重要依据.

关键词：猪乙型脑炎病毒、E蛋白、结构域Ⅲ、诊断抗原

所属期刊栏目：43

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：瑞普生物研究院猪乙型脑炎耐热保护剂活疫苗专项基金项目RPBVI20130008

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：934-939