猪链球菌rGDH蛋白原核表达载体的构建及免疫原性分析

摘要：

谷氨酸脱氢酶(GDH)在猪链球菌35个血清型中都存在,是一种具有免疫原性的保护性抗原.本试验PCR扩增出GDH基因,酶切定向插入pET-32a中构建表达载体pET-32a-GDH,将其转化E.coli BL21(DE3)表达菌中,培养并诱导表达rGDH蛋白,产物纯化后免疫新西兰白兔,免疫攻毒保护试验检验该蛋白的免疫原性.PCR试验获得约1 300 bp的GDH基因,双酶切pET-32a-GDH表达载体获得5.4和1.3 kb的片段,IPTG诱导表达获得融合蛋白,免疫保护结果达到70％.结果表明,本试验成功构建表达猪链球菌GDH蛋白的原核表达载体pET-32a-GDH,rGDH蛋白以蜂胶为佐剂免疫模型动物后,免疫保护率达到70％,为猪链球菌亚单位疫苗的研制提供了技术支持.

关键词：猪链球菌、谷氨酸脱氢酶(GDH)、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：山东省自然科学基金青年基金项目ZR2014CQ009;滨州市科技发展计划项目2013GG0304;山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队SDAIT-06-011-14

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2594-2599