反转录病毒载体RCASBP介导的EGFP基因在DF-1细胞中的表达

摘要：

为建立反转录病毒载体RCASBP介导的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在DF-1细胞中的表达体系,本研究将PCR获得的EGFP基因插入反转录病毒载体RCASBP,构建重组反转录病毒载体RCASBP-EGFP,之后将重组载体转染DF-1细胞;用基于禽白血病病毒(ALV) p27抗原的ELISA检测盲传至第4代的细胞上清,ELISA阳性结果说明重组病毒拯救成功;荧光显微镜观察发现80％以上DF-1细胞都有明显的绿色荧光信号,证明DF-1细胞表达绿色荧光蛋白;对DF-1细胞基因组进行特异性PCR检测,扩增出特异性条带说明重组反转录病毒载体RCASBP-EGFP携带的EGFP基因整合到DF-1细胞的基因组中.本研究建立的RCASBP介导反转录病毒表达体系为研究ALV基因的结构和功能奠定了基础.

关键词：禽白血病病毒、反转录病毒载体RCASBP、增强型绿色荧光蛋白基因、DF-1细胞

所属期刊栏目：42

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家肉鸡产业技术体系CARS-42-G09;农业部公益性行业科研专项201203055;广东省科技计划项目2012A020100001

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2538-2543