猪腺病毒3型Hexon蛋白多克隆抗体制备与免疫活性鉴定

摘要：

本研究旨在制备猪腺病毒3型(PADV-3)Hexon蛋白多克隆抗体.试验构建重组原核表达载体pET28a-Hexon,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行Western blotting鉴定,目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫家兔制备Hexon蛋白多克隆抗体.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果显示,Hexon蛋白原核表达以包涵体形式存在,分子质量约为105 ku;真核细胞表达的Hexon蛋白均定位于HEK293细胞质内,细胞核内无分布;IPMA测定所制备的多克隆抗体滴度为1∶1 600,该抗体与体外培养的PADV-3及稳定表达Hexon蛋白的细胞均呈特异性反应.结果表明本试验制备的PADV-3型Hexon蛋白多克隆抗体免疫活性和特异性良好.

关键词：猪腺病毒3型、Hexon基因、多克隆抗体

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分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然基金青年基金31101837;河南省重点科技攻关项目142102110101;南阳师范学院引进人才专项项目70640

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8