牛干扰素-γ基因的克隆、序列分析及表达研究

摘要：

为了使干扰素-γ(interferon γ,IFN-γ)在牛结核等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,试验采用RT-PCR法从云南本地黄牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增牛IF N-γ(BoIFN-γ)基因,测序并进行序列分析;然后亚克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达.序列分析结果表明,克隆的IFN-γ基因与GenBank中荷斯坦牛IFN-γ序列同源性达99.60％.表达产物经SDS-PAGE分析,在大小约23 ku处可见目的蛋白表达条带,与预期结果一致;用ELISA检测,表达的蛋白具有明显的生物学活性,在菌体中的含量为244 ng/mL.本试验结果为牛IFN-γ蛋白的进一步研究和应用奠定了基础.

关键词：牛干扰素-γ、序列分析、原核表达、生物学活性

所属期刊栏目：41

分类号：Q52(核酸)

资助基金：国家自然科学基金31260598;云南省应用基础重点项目2011FA014

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6