猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测

摘要：

本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549 bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET 32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21.从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序.将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达.得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39 ku位置有蛋白条带.将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Western blotting检测,可见在39 ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性.本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控.

关键词：猪瘟病毒C株、A/D主要抗原区、截短表达

所属期刊栏目：41

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：公益性行业农业科研专项201203056;国家基金面上项目31172321;广东省高等学校科技创新重点项目2012CXZD0013

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：12-16