水貂阿留申病毒NS1基因在大肠杆菌中的分段表达

摘要：

利用DNAStar Protean模块预测分析水貂阿留申病毒(aleutian disease virus,ADV) NS1基因后,设计3对特异性引物,以吉林农业大学经济动物实验室保存的NS1全长克隆质粒NS1-pMD18-T为模板扩增NS1基因的3个截短片段,分别命名为L1N1、L2N2、L3N3基因,构建克隆质粒pMD18-T L1N1、pGEM-T-L2N2及pMD18-T-L3N3.经测序鉴定正确后,将经EcoR Ⅰ、Sal Ⅰ双酶切的3个NS1基因片段连接至经相同双酶切的pGEX 4T-1原核表达载体,并转化入表达宿主菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达.采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况.结果表明,成功构建了3段重组原核表达质粒pGEX-4T-L1 N1、pGEX-4T-L2N2、pGEX 4T-L3N3,SDS-PAGE结果显示分别表达出大小约57、51、44 ku的目的条带,与预期相符.Western blotting进一步证实获得的3种蛋白能被ADV阳性血清识别,具有反应原性.本试验首次对ADV NS1基因在大肠杆菌中进行分段表达,为后续研制ADV的亚单位疫苗奠定基础.

关键词：水貂阿留申病毒NS1基因、大肠杆菌、分段表达

所属期刊栏目：41

分类号：S858.92(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31272565

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：32-36