抗三肽囊素单克隆抗体的制备

摘要：

为研制抗三肽囊素(bursin,KHG-NH2)的单克隆抗体,本试验采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA或OVA)定向偶联,分别制备三肽囊素免疫抗原(BSA-KHG-NH2)和检测抗原(OVA-KHG-NH2).以BSA-KHG-NH2免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选到18株能稳定分泌抗三肽囊素单克隆抗体的杂交瘤细胞株.这18株单克隆抗体与三肽囊素人工抗原的结合均能被三肽囊素、GKHG-NH2四肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明18株单抗与三肽囊素分子的结合具有高度特异性.以本研究制备的单抗2D2建立间接竞争ELISA方法,检测三肽囊素含量,检测下限为4 ng/mL,线性范围为4～500 ng/mL,加标检测回收率为85.0％～92.4％.

关键词：三肽囊素、人工抗原、单克隆抗体、间接竞争ELISA

所属期刊栏目：40

分类号：S852.4+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31160498;江西省自然科学基金2010GZN0046;江西省教育厅项目GJJ11402

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：76-80