刚地弓形虫Rop18基因的原核表达及鉴定

摘要：

利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出Rop18基因片段,克隆入pET-30a载体,将重组质粒转化入大肠杆菌Top10中,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序.测序结果与参考序列(登录号:JX045329.1)比对发现,核苷酸同源性为99.6％.将阳性重组质粒转化入大肠杆菌BL21中,表达产物经SDS-PAGE检测结果显示,Rop18基因在大肠杆菌中成功表达;融合蛋白的分子质量在66.2 ku左右,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别.结果表明,弓形虫RH株Rop18基因可以在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗候选抗原.

关键词：弓形虫、Rop18基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：40

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金20123326120004;浙江省自然科学基金LQ12C18001;国家自然科学基金31201895

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：72-75