表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建与鉴定

摘要：

通过PCR方法扩增猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)核定位序列部分缺失的ORF2基因(pdCap),将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的pBACsurf-1质粒中,得到重组质粒pBACsurf-1-pdCap.再将含有pdCap和gp64的融合基因克隆到杆状病毒并转移到质粒pFastBacTM Dual中,得到重组质粒pFastBac-pdCap.然后将该重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞中,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,得到重组穿梭质粒Bacmid-pdCap.在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-pdCap.间接免疫荧光和Western blotting试验结果表明,该重组杆状病毒成功表达了具有良好反应原性的pdCap蛋白.

关键词：猪圆环病毒2型、pdCap蛋白、杆状病毒表达系统

所属期刊栏目：40

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广州市"珠江科技新星专项"项目2012J2200086;公益性行业项目201303034;863计划项目2011AA10A209;973计划项目2011CB504701

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6-10