10.3969/j.issn.1671-7236.2012.12.001
猪11β-HSD1真核过表达载体的构建及其在Hepa1-6细胞中的表达
11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)可使无生物活性的皮质酮催化为有活性的皮质醇,本试验利用长白猪肝脏组织提取的RNA反转录出11β-HSD1基因的cDNA,通过反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和DNA重组技术,将11β-HSD1基因构建到pcDNA3.1真核表达载体上,构建了11β-HSD1-pcDNA重组质粒.通过PCR扩增、酶切电泳和测序分析的方法对重组的质粒进行了鉴定,并将其转染了Hepa1-6细胞,通过RT-PCR检测了其过表达强度.试验结果表明,成功构建了猪11β-HSD1-pcDNA真核过表达载体,为转基因动物的研究奠定了基础.
11β-HSD1、真核表达、基因克隆、载体构建、转基因
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家科技支撑计划2012BAI39B04,2011BAI15B02;"863"计划SQ2011AAJY2795;"973"计划2011CBA01005
2013-01-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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