水牛徒手克隆胚胎培养及冷冻条件的优化

摘要：

本试验利用微滴、微穴和平板培养系统对徒手克隆(hand-made clone,HMC)重组胚进行体外培养；采用了40％EG(ethylene glycol,EG)、25％EG+ 25％DMSO(dimethylsulphoxide,DMSO)和20％ EG+20％ DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为玻璃化冷冻液对HMC囊胚进行了超低温冷冻；并且比较了HMC与传统核移植的胚胎生产效率及囊胚冷冻存活率.结果表明,微穴系统的卵裂率要显著高于平板系统(P＜0.05),极显著高于微滴系统(P＜0.01)；且微穴系统的囊胚率(40.0％)极显著高于平板(19.8％)和微滴系统(8.3％)(P＜0.01).采用20％ EG+20％ DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻保护剂时HMC囊胚存活率极显著高于40％ EG(P＜0.01)；HMC重组胚的融合率和囊胚率均高于传统核移植法(P＜0.05;P＜0.01),而HMC囊胚的冷冻存活率与传统核移植生产的囊胚没有显著差异.以上结果说明水牛HMC可以替代传统核移植法生产克隆胚胎,微穴体系最适合水牛HMC胚胎的体外培养,且采用20％ EG+20％ DMSO+0.5 mol/L蔗糖对HMC囊胚进行玻璃化冷冻可以取得良好的冷冻效果.

关键词：水牛、HMC胚胎、培养、冷冻

所属期刊栏目：39

分类号：Q813.7(生物工程学(生物技术))

资助基金：科技部国际科技交流与合作专项2008DFA30320;农业部948项目2006-G49;桂科攻1123005-1;广西"特聘专家"专项经费资助

在线出版日期：2013-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：145-149