糖化酶单抗的研制及其抗原识别位点的分析

摘要：

为建立掺糖造假蜂蜜中残留糖化酶的检测方法,用从黑曲霉中提取的糖化酶作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了12株稳定分泌针对糖化酶抗体的杂交瘤细胞株.单克隆抗体亚型鉴定结果显示,10株为IgG1,2株为IgG2b,轻链均为к轻链.Western blotting分析结果表明,12株抗体均可特异性结合糖化酶.其中6株单抗(McAb-2H4F9、6H9D8、8F2F11、8F2E9、1A8G6、1C4D5)细胞株采用体内诱生法制备的腹水效价均1:1×104以上.采用抗体叠加试验对这6株抗糖化酶单抗的抗原识别位点进行检测,反应增殖结果表明,6株单抗分别针对4类不同抗原位点,McAb-6H9D8和McAb-8F2F11针对第Ⅰ种抗原决定簇；McAb-1A8G6和McAb-1C4D5针对第Ⅱ种抗原决定簇；McAb-8F2E9针对第Ⅲ种抗原决定簇；McAb-2 H4F9针对第Ⅳ种抗原决定簇.制备的抗体针对不同的抗原表位,为双抗夹心ELISA方法的建立提供前提.

关键词：淀粉糖化酶、单克隆抗体、抗原识别位点

所属期刊栏目：39

分类号：S852.4+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏高校优势学科建设工程和江苏省高校重点实验室开放课题资助

在线出版日期：2013-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：39-42