脂质体瞬时转染siRNA抑制肾小管上皮细胞去乙酰化蛋白酶1的表达

摘要：

建立有效的脂质体瞬时转染法,将小干扰RNA(siRNA)转染至小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),从而抑制其乙酰化组蛋白酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)的表达.使用阳离子脂质体法瞬时转染小鼠肾小管上皮细胞,用荧光标记siRNA(FAM-siRNA)筛选转染比例,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)确定最优条件并检测不同位点(374,525和822)HDAC1-siRNA的抑制效果,噻唑蓝(MTT)法检测不同时间点HDAC1-siRNA对RTECs增殖的影响,并设立曲古霉素处置组作为试验对照.荧光表达和Real-time PCR结果显示30 pmol siRNA∶1.5 μL LipofectamineTM 2000为最佳转染条件,HDAC1-374的干扰效果最明显.MTT检测结果显示,HDAC1-374与TSA一致,证实HDAC1-siRNA能有效抑制RTECs的增殖.本试验利用脂质体瞬时转染siRNA法成功抑制了RTECs中HDAC1的表达.

关键词：HDAC1-siRNA、RTECs、FAM-siRNA、MTT

所属期刊栏目：39

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目30972215:北京市自然科学基金资助6092004,5102014

在线出版日期：2012-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4-10