猪流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要：

本研究选取猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的NP基因序列设计引物和探针,建立了检测SIV的TaqMan实时荧光定量PCR方法.以梯度稀释的含有SIV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.2.0×108至2.0× 102拷贝/μL 7个数量级的范围内定量PCR有“S”型扩增曲线,检测灵敏度为20个拷贝/μL.根据病毒拷贝数与Ct值的关系绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸都没有扩增反应.本研究建立的实时定量PCR方法,灵敏度高、特异性好,可以进行定量分析,在猪流感的快速检测上具有重要意义.

关键词：猪流感病毒、实时荧光定量PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：39

分类号：S851.21(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质量监督和检验检疫总局科研立项2010IK023

在线出版日期：2012-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：181-184