伪狂犬病毒EPO基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究

摘要：

为了研究EP0蛋白在伪狂犬病毒粒子中的定位及其功能,试验利用PCR从伪狂犬病毒基因组中扩增PRV EP0基因的编码区,克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒pMD-EP0.经测序鉴定正确后,用EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切pMD-EP0,回收EP0基因与经同样双酶切处理的pET-32a(+)进行连接,构建重组质粒pET-EP0.将pET-EP0转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,通过SDSPAGE和Western blotting检测融合蛋白的表达情况及反应原性.结果表明,成功扩增得到EP0基因编码区序列,大小为1227 bp;重组表达质粒pET-EP0经诱导后,EP0融合蛋白获得了表达,大小约为75 ku,主要以包涵体形式存在,且能与伪狂犬病毒阳性血清反应.

关键词：伪狂犬病毒、EP0基因、克隆、表达

所属期刊栏目：39

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31001074;广东省科技计划项目2008B020600003

在线出版日期：2012-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：57-60