Vero E6细胞中B23.1基因的扩增及其原核表达

摘要：

应用RT-PCR技术,利用含有酶切位点的上、下游引物扩增得到Vero E6细胞中编码B23.1蛋白的基因片段,并进行序列测定及分析,结果表明,B23.1基因含有一个长901 bp的开放阅读框(ORF),未发现碱基的插入和缺失.将其进行BamH I和Xho Ⅰ双酶切,而后定向克隆到经相同双酶切的pGEX-6p-1载体中,构建的重组质粒命名为pGEX-6p-B23.1；将该质粒转化入大肠杆菌BL21( DE3)中,在IPTG诱导下进行表达；SDS- PAGE结果表明,表达出与预期大小相符的约68 ku的重组蛋白,重组蛋白主要以包涵体形式存在；Western blotting分析结果表明,表达的重组蛋白与B23蛋白单克隆抗体有很好的反应活性.

关键词：Vero E6细胞、B23.1基因、重组蛋白、反应活性

所属期刊栏目：39

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费200805

在线出版日期：2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：33-36