牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备

摘要：

根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因.将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7％.将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+ )-rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49 ku；表达产物主要分布在包涵体中.Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白.用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料.

关键词：白细胞介素-2、原核表达、多克隆抗体

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省教育厅科学研究项目10531005;黑龙江省自然科学基金重点项目ZJN0702-01

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：71-75