荧光定量RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒方法的建立与验证

摘要：

根据H5亚型禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计合成引物,以H5亚型禽流感病毒HA基因重组质粒为标准品绘制标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应检测方法.结果表明,本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.995,灵敏度约为8拷贝/μL,相当于8个AIV颗粒,对新城疫病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好、重复性佳,为H5亚型禽流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速、低成本、高通量、生物安全性好的定量检测方法.对178份临床泄殖腔棉拭子样品的检测,该方法结果与经典病毒分离方法符合率大于90.0％,在禽流感病毒临床样品快速筛检、流行病学监测等方面显示了良好的应用前景.

关键词：H5亚型禽流感病毒、荧光定量RT-PCR、建立、验证

所属期刊栏目：38

分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金重点项目30630048;江苏省农业三项工程项目SX2008092

在线出版日期：2012-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：169-174