PCR结合变性高效液相色谱法与荧光定量PCR法在检测禽白血病中的比较与应用
本研究旨在比较PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)与荧光定量PCR (Real-time PCR)两种方法在检测禽白血病中的应用.根据禽白血病pol基因序列,设计1对引物和1条探针,利用引物进行禽白血病模板的RT-PCR扩增,产物经变性高效液相色谱上样处理；利用引物及探针进行荧光定量PCR扩增,结果与PCR-DHPLC进行比对.两种方法同时用正常鸡胚尿囊液、鸭瘟病毒、传染性支气管炎病毒、鹅细小病毒、H5N1亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、减蛋综合症病毒做特异性检测;以稀释成不同梯度的AV228毒株核酸做敏感性检测.试验结果表明PCR-DHPLC方法只对禽白血病病原有阳性扩增的吸收峰,Real-time PCR也只对禽白血病病原有阳性扩增,两法均对其他禽源病毒核酸无特异性扩增；PCR-DHPLC与Real-time PCR法相比,灵敏度虽低于Real-time PCR 1个数量级,但检测限仍可达到3 pg核酸模板.两种方法均能检测到感染鸡的泄殖腔拭子所采集的病毒量.采集120份蛋鸡棉拭子同时进行临床检测,两种方法检测ALV的符合率为100％(15/120).研究表明两种方法均可用于诊断禽白血病病毒.
禽白血病病毒、RT-PCR、变性高效液相色谱
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S852.65(动物医学（兽医学）)
国家质检总局科研项目2009IK005;山东出入境检验检疫局科研项目SK200904
2012-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
157-162
