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猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白gD主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

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本试验通过PCR方法以猪伪狂犬病病毒SD株的基因组DNA为模板扩增得到了含gD主要抗原表位编码区的片段,将该PCR产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32a的T7启动子下游.构建的重组质粒pET-gD经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21( DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子质量约为45.2 ku,主要以包涵体形式存在.表达产物用His亲和层析柱纯化.Western blotting结果显示,该纯化蛋白能与猪伪狂犬病病毒抗体阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原反应性,可以作为猪血清伪狂犬病病毒抗体诊断用抗原.

伪狂犬病病毒、gD糖蛋白、主要抗原表位、原核表达

38

Q78(基因工程(遗传工程))

"十一五"国家科技支撑项目2006BAD6A13

2012-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

83-86

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