狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区真核表达载体的构建及其在DK细胞中的表达
为了研究狂犬病病毒(rabies virus,RV)糖蛋白(rgp)膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体中,经测序比对正确后,通过酶切将其亚克隆人pVAX1表达载体的多克隆酶切位点处,将酶切鉴定正确的阳性重组子命名为pVAX-rgp,构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的真核表达载体,在质脂体介导下转染DK细胞观察其表达情况.研究结果表明,经免疫荧光和Western blotting 鉴定,有特异性荧光和60 ku条带产生,证明pVAX-rgp载体中的rgp可在DK细胞中表达.本研究通过成功构建狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区的真核表达载体,为下一步有关功能基因组的研究和基因疫苗的研制奠定了基础.
狂犬病病毒糖蛋白膜外区、真核表达、转染、DK细胞
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目30901067;高等学校博士学科点专项科研基金20094404120016;广东省科技计划项目2009B020307011;广东省自然科学基金10451064201005443;广东省高等学校自然科学基金9451064201003715;畜疫病病原生物学国家重点实验室SKLVEB2009KFKT014,SKLVEB2010 KFKT010
2011-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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