牛分支杆菌αg85b基因原核表达载体的构建

摘要：

为构建牛分支杆菌αg85b基因的重组表达质粒pET-32a-ag85b,采用聚合酶链反应(PCR)从牛分支杆菌AF2122/97基因组DNA中扩增出αg85b基因(978 bp),然后对扩增产物和载体pET-32a以核酸内切酶EcoR Ⅰ及Sal Ⅰ分别进行双酶切;将两种酶切产物以T4 DNA Ligase连接,将靶基因克隆入载体pET-32a,构建重组质粒.将此重组质粒转化人大肠杆菌DH5α,抽提重组质粒首先经EcoR Ⅰ及Sal Ⅰ双酶切检验,再进行PCR扩增鉴定,最后测序鉴定.酶切片段及PCR扩增片段大小均与预期相符,测序结果与GenBank登录序列完全相同.结果表明,成功地克隆并构建了αg85b基因重组表达质粒pET-32a-ag85b.

关键词：牛分支杆菌、抗原、ag85b、基因重组

所属期刊栏目：38

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：云南省十五科技攻关子项目2002NG03;云南省高端科技人才引进计划项目2009CI125

在线出版日期：2011-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：121-123