牛γ-干扰素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
根据GenBank发表的牛γ-干扰素基因设计1对特异性引物,从牛脾脏淋巴细胞提取基因组总RNA,采用反转录一聚合酶链式反应(reverse transcriptase-PCR,RT-PCR)技术扩增出IFN-γ基因,与pMD18-T载体连接后进行酶切、PCR鉴定及序列测定和分析,并将其连接到pQE-30原核表达载体中,命名为pQE30-IFN-γ,转化到大肠杆菌x-LI Blue感受态细胞,IPTG(1.0 mmol/L)37℃诱导表达.结果显示,对重组质粒进行PCR鉴定,扩增到510 bp片段.重组蛋白大小为22 ku,与预期大小相符;Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag单克隆抗体反应,为下一步研究干扰素的功能奠定了基础.
干扰素、基因、克隆、表达
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Q78(基因工程（遗传工程）)
黑龙江八一农垦大学硕士启动基金资助项目S2005-34;黑龙江省教育厅资助项目11531262;黑龙江省科技厅青年基金项目QC2010051
2011-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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