牛轮状病毒TaqMan实时荧光RT-PCR快速检测方法的建立

摘要：

本研究按照牛轮状病毒(BRV)结构蛋白VP6基因序列,设计合成引物和探针,经各反应条件的优化,建立了BRVTaqMan实时荧光定量RT-PCR技术.对BRV进行了特异性、敏感性和重复性试验.结果表明,TaqMan实时荧光RT-PCR最低可检测到100个拷贝病毒RNA;与牛病毒性腹泻病毒(BVD)、猪瘟病毒(CSFV)、牛结核杆菌(MB)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)不发生交叉反应;所制作的标准曲线在102～109拷贝/μL浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.997;与常规的RT-PCR相比,该方法具有快速、特异、敏感、重复性好、可同时检测大量样品等优点.可对样品中微量BRV进行准确检测,对BRV的诊断有重要意义.

关键词：牛轮状病毒、TaqMan实时荧光定量PCR、检测

所属期刊栏目：38

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家百千万人才工程人选专项资金资助945200603;广西科技攻关与新产品试制项目桂科合0992033-5

在线出版日期：2011-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：105-108