猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达

摘要：

用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因,分析ORF3蛋白的抗原性.根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析,针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物,PCR扩增该基因,并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上,命名为pET32a-ORF3,转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3)pLac Ⅰ感受态细胞,1.0 mmol/L IPTG 37℃诱导表达.结果表明,PCR扩增得到315 bp的片段,重组蛋白大小约为29 ku,与预期大小相符.Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应.不与PCV-2阳性血清发生反应.猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达,但与阳性血清之间没有反应原性,为进一步研究PCV-2 ORF3蛋白的功能及特性奠定基础.

关键词：猪圆环病毒2型、ORF3基因、原核表达

所属期刊栏目：37

分类号：S852.65+9.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省农垦总局课题HNKXIV-08-07A;黑龙江八一农垦大学博士科研启动项目校启D2007-1

在线出版日期：2010-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：171-174