猪戊型肝炎病毒ORF2主要抗原表位区间接ELISA方法的初步建立

摘要：

应用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端和N端的主要抗原表位区,重组蛋白命名为ORF2-C和ORF2-N,初步建立间接ELISA诊断方法.用重组蛋白ORF2-C和ORF2-N作为诊断抗原,对反应条件进行优化,初步建立ELISA诊断方法.抗原最适包被浓度ORF2-C为8μg/mL、ORF2-N为12μg/mL;血清最适稀释度均为1:50,ORF2-C作用时间为50 min、ORF2-N作用时间为90 min;酶标抗体最适稀释度为1: 5000;ORF2-C判定标准:D450nm值≥0.348为阳性,D450nm值<0.348为阴性;ORF2-N判定标准:D450nm值≥0.397为阳性,D450nm值<0.397为阴性.与戊型肝炎病毒诊断试剂盒检测结果相比,阳性符合率分别为93.3%、86.7%.利用重组蛋白建立的ELIsA方法特异性、敏感性和重复性均较好,且ORF2-C的检测效率明显高于ORF2-N,该方法的初步建立为进一步完善猪戊型肝炎病毒诊断方法奠定基础.

关键词：猪戊型肝炎病毒、ORF2、主要抗原表位区、ELISA

所属期刊栏目：37

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目11521201

在线出版日期：2010-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：99-102