蜜蜂球囊菌全长cDNA文库的构建与分析
本试验利用TRIzol试剂盒提取蜜蜂球囊菌总RNA,通过Oligotex纯化试剂盒将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得蜜蜂球囊菌cDNA原始文库,其滴度测定为1.6×106PFU/mL,扩增后的滴度是1.5×109PFU/mL;取适量扩增文库稀释并铺平板,蓝白斑筛选独立噬菌斑,用M13±通用引物进行PCR扩增后,文库的重组率达到90%,插入cDNA片段的长度在0.5~2 kb.该文库的构建,有利于筛选目的基因,便于深入研究蜜蜂白垩病的侵染机制,最终有效防制白垩病.
蜜蜂球囊菌、全长cDNA文库、噬菌体
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S826.9+2(家畜)
国家自然科学基金项目30600454;福建省自然科学基金项目B0510023;蜂产业体系项目nyhyzx07-041
2010-05-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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