蜜蜂球囊菌全长cDNA文库的构建与分析

摘要：

本试验利用TRIzol试剂盒提取蜜蜂球囊菌总RNA,通过Oligotex纯化试剂盒将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得蜜蜂球囊菌cDNA原始文库,其滴度测定为1.6×106PFU/mL,扩增后的滴度是1.5×109PFU/mL;取适量扩增文库稀释并铺平板,蓝白斑筛选独立噬菌斑,用M13±通用引物进行PCR扩增后,文库的重组率达到90%,插入cDNA片段的长度在0.5～2 kb.该文库的构建,有利于筛选目的基因,便于深入研究蜜蜂白垩病的侵染机制,最终有效防制白垩病.

关键词：蜜蜂球囊菌、全长cDNA文库、噬菌体

所属期刊栏目：37

分类号：S826.9+2(家畜)

资助基金：国家自然科学基金项目30600454;福建省自然科学基金项目B0510023;蜂产业体系项目nyhyzx07-041

在线出版日期：2010-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：112-115