猪瘟病毒四川分离株E2基因的分子克隆、原核表达及免疫学活性分析

摘要：

分子克隆猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)四川分离株E2基因,并对其进行原核表达及免疫学活性分析.PK-15细胞培养增殖CSFV四川分离株提取总RNA,运用RT-PCR扩增E2基因,定向克隆构建原核重组表达载体,转化E.coli Rosetta-gami-TM(DE3)plysS,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达,western blotting分析表达蛋白的免疫学活性.试验结果表明,成功克隆了E2基因,共1119 bp,包含有编码E2蛋白的完整序列,编码373个氨基酸;成功构建了CS-FV E2基因完整阅读框、主要抗原区原核表达载体pET-E2(pe)、pET-mE2(pe);蛋白质电泳结果显示,成功表达出约45.32、28.49 ku两目的蛋白,而且表达的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白均能被CSFV阳性血清所识别,具有良好的免疫学反应活性.因此,本试验成功获得CSFV四川分离株E2基因,表达出具有生物学活性的E2(pe)、mE2(pe)融合蛋白.

关键词：猪瘟病毒、四川分离株、E2基因、原核表达、免疫学活性

所属期刊栏目：37

分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：科技部国家科技支撑计划项目2006BAD06A18;教育部长江学者和创新团队发展计划项目IRTO848

在线出版日期：2010-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：65-71