牛对氧磷酶1基因和对氧磷酶2基因原核表达载体的构建及其表达分析

摘要：

为制备和纯化对氧磷酶(PON1和PON2)蛋白做准备,对牛的PON1和PON2基因进行克隆并在大肠杆菌中表达.从牛肝脏组织中用RT-PCR扩增PON1和PON2 cDNA的全长编码序列,连接到原核表达载体pET28a中,构建重组表达质粒并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析表达情况.结果表明,成功克隆了PON1和PON2两个基因的cDNA的全长编码序列,酶切及测序鉴定证明,获得含有目的基因片段的重组质粒,表达的牛的PON1和PON2融合蛋白以可溶性的形式存在.这为进一步制备和纯化PON1和PON2蛋白,以及探索其在家畜使用寿命中的研究和提高犊牛初生重的作用等方面提供依据.

关键词：对氧磷酶、对氧磷酶1基因、对氧磷酶2基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：35

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金："十一五"国家高技术研究发展计划"863"计划2006AA10Z197;"十一五"国家科学技术支撑计划"农林动作物育种"2006BAD01A10

在线出版日期：2008-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：59-63