银狐生长激素cDNA克隆和原核表达

摘要：

为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamH Ⅰ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,并将其重组到pPROECTM Hta质粒中,构建了银狐生长激素原核表达质粒pPRO-EXTMHta-fGH.将pPROEXTM Hta-fGH原核表达质粒转化DH5α大肠杆菌,用终浓度1 mmol/L IPTG进行诱导,通过SDSPAGE进行检测.结果表明在转化的大肠杆菌中检测到分子量为26 kD的fGH蛋白的存在,表达量占菌体蛋白总量的35%,并且表达产物以包涵体的形式存在.

关键词：银狐、生长激素、克隆、原核表达

所属期刊栏目：35

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：26-30