自噬在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化过程中的作用研究

摘要：

目的：探讨自噬在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）钙化过程中的作用。方法：采用磷酸盐（3.2 mmol/L Pi，即高磷状态）建立大鼠VSMC钙化模型。实验分为三组：对照组、钙化组（分为3个亚组：3.2 mmol/L Pi 4 d组、3.2 mmol/L Pi 6 d组、3.2 mmol/L Pi 8 d组）；钙化+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（3.2 mmol/L Pi 8 d+5 mmol/L 3-MA）。分别通过茜素红S染色法和邻甲酚肽络合酮比色法检测各组细胞钙结节形成及钙含量；蛋白免疫印迹法检测各组细胞转录因子蛋白（Runx2）、α-肌动蛋白（α-SMA）和自噬相关蛋白—膜型微管蛋白1轻链3β（LC3Ⅱ）蛋白表达量。透射电子显微镜观察VSMC内自噬小体形成情况。免疫荧光显微镜下观察VSMC中LC3和Runx2定位表达。结果：与对照组相比，3.2 mmol/L Pi 8 d组钙结节、钙含量、Runx2和LC3Ⅱ蛋白表达量及自噬小体均显著增高，α-SMA蛋白表达量降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。与3.2 mmol/L Pi 8 d组相比，钙化+3-MA组细胞钙含量增多，LC3荧光分布量降低，Runx2阳性细胞数增多，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：自噬在磷酸盐诱导的VSMC钙化过程中具有保护作用。

关键词：自噬、磷酸盐类、肌、平滑、钙质沉着症

所属期刊栏目：31

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金81170256；陕西省科技计划项目2009K13-01

在线出版日期：2016-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：484-488