冷刺激对乳鼠心肌细胞缝隙连接蛋白43的影响及药物干预的研究

摘要：

目的：在急性冷刺激乳鼠心肌细胞模型下，评价缝隙连接蛋白43（Connexin43,Cx43）的表达及研究急性冷刺激时乳鼠心肌细胞间传导的变化及其机制。<br>　　方法：乳鼠心肌细胞原代培养，随机分为正常对照组，实验4℃组；实验0℃组；并在实验4℃组和实验0℃组分别加入100 nmol/L抗心律失常肽（APP）10，每组乳鼠8只。采用流式细胞术（FCM）分析各组细胞的凋亡率，应用聚合酶链反应(PCR)和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Cx43及其磷酸化水平在基因和蛋白上的表达。<br>　　结果：FCM结果显示：实验4℃组和实验0℃组随着冷刺激程度加强和低温时间的延长，心肌细胞的凋亡率增加；同时PCR结果显示：实验4℃组和实验0℃组Cx43 mRNA呈现不同程度的下降；Western blot结果显示：实验4℃组和实验0℃组随着刺激强度和低温时间的延长，Cx43蛋白表达亦出现不同程度的下降；磷酸化的Cx43(P-Cx43)蛋白表达亦下降，而AAP10干预后可提高两组Cx43和P-Cx43蛋白的表达。<br>　　结论：心肌细胞在急性冷刺激时Cx43在基因和蛋白水平上表达均有不同程度的下降，P-Cx43表达亦下降，而AAP10能提高Cx43和P-Cx43蛋白的表达从而改善细胞间的传导。

关键词：冷刺激、心肌细胞、缝隙连接蛋白43、磷酸化、抗心律失常肽

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

在线出版日期：2015-02-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：59-63