10.3969/j.issn.1000-3614.2014.10.017
钙敏感受体对巨噬细胞泡沫化过程的影响及机制研究
目的:研究钙敏感受体(CaR)在巨噬细胞中的表达情况及对巨噬细胞转化为泡沫细胞的影响。方法:通过免疫荧光和蛋白印迹(Western Blot)检测巨噬细胞中CaR的表达情况;氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)100 mg/L作用48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞;实验分组为CaR激动剂组、CaR抑制剂组、空白对照组,分别作用泡沫细胞48 h:采用油红O染色检测阳性细胞数量;高效液相色谱观察细胞内胆固醇代谢情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中炎性因子的分泌情况;Western blot检测细胞内CD36和胆固醇酰基转移酶(ACAT-1)蛋白的表达情况。结果: Western blot和免疫荧光结果显示在巨噬细胞中存在CaR的表达。油红O染色和高效液相色谱检测泡沫细胞的结果显示:与空白对照组比较,CaR激动剂组阳性细胞数量和胆固醇酯、游离胆固醇、总胆固醇的含量均明显下降(P<0.05),而CaR抑制剂组阳性细胞数量和胆固醇酯、游离胆固醇、总胆固醇的含量均明显升高(P<0.05);ELISA 检测结果显示:与空白对照组比较,CaR激动剂组促炎因子肿瘤坏死因子-(TNF- a)、巨噬细胞游走抑制因子(MIF)含量明显降低(P<0.05),抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)含量明显升高(P<0.05),而CaR抑制剂组促炎因子TNF- a、 MIF 含量明显升高(P<0.05),抗炎因子IL-10含量明显降低(P<0.05);Western blot检测各组泡沫细胞结果发现:与空白对照组比较,CaR激动剂组CD36和ACAT-1蛋白表达明显下降,而CaR抑制剂组CD36和ACAT-1蛋白表达明显升高。结论:在巨噬细胞中存在CaR的表达,并且高表达的CaR可以抑制巨噬细胞泡沫化的形成。
钙敏感受体、巨噬细胞、CD36、胆固醇酰基转移酶
R541(心脏、血管(循环系)疾病)
辽宁省自然科学基金2013022010;辽宁医学院青年科技启动基金项目XZJJ20130246;辽宁医学院附属第一医院青年科技启动基金项目FY2012-07
2014-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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