优化超声辐照条件促进EGFP在293 T细胞内转染的实验研究
目的：探讨超声辐照促进EGFP转染至293T细胞的最佳条件。<br> 方法：将293T细胞种植于24孔板内，细胞密度1.5×105/孔，24 h后更换为转染液进行超声辐照。根据辐照条件分别优化输出功率、辐照时间、微泡浓度。质粒浓度固定选择15μg/ml；输出功率选择1.5 w/cm2、2.0 w/cm2、2.5 w/cm2；辐照时间选择30s、45s、60s；微泡浓度选用20%、30%、40%。转染液为EGFP、微泡、Opti-MEM的混合液，总体积为1 ml，微泡选用sonovue，EGFP质粒浓度为1μg/μl。辐照仪器为超声基因转染仪，辐照后4 h更换为不含抗生素含血清的DMEM培养基。每个条件相互组合，重复4次。转染后72 h荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光蛋白的绿色荧光，流式细胞仪检测荧光细胞比例，CCK-8检测细胞存活率，计算转染效率=荧光细胞比例×细胞存活率。统计方法采用多因素方差分析。
优化、超声辐照、细胞内、转染效率、绿色荧光蛋白、细胞存活率、输出功率、浓度、辐照时间、流式细胞仪检测、多因素方差分析、时间选择、质粒、荧光显微、细胞种植、细胞密度、统计方法、镜下观察、基因转染、培养基
R73;R96
2014-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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